> Блог > Вести од индустријата

Кои се функциите на комплетот ELISA?

2022-12-23

Комплетот ELISA се базира на цврста фаза на антиген или антитело и ензимско означување на антиген или антитело. Антигенот или антителото врзани за површината на цврстиот носач сè уште ја задржуваат својата имунолошка активност, а ензимскиот означен антиген или антитело ја задржува и својата имунолошка активност и ензимската активност. Во моментот на определување, примерокот што се тестира (во кој се мери антителото или антигенот) реагира со антигенот или антителото на површината на цврстиот носач. Комплексот антиген-антитела формиран на цврстиот носач се одвојува од другите супстанции во течноста со миење.

Се додаваат ензимски означени антигени или антитела, кои исто така се врзуваат за цврстиот носач со реакција. Во тоа време, количината на ензимот во цврстата фаза е пропорционална со количината на супстанцијата во примерокот. По додавањето на супстратот на ензимската реакција, супстратот се катализира од ензимот за да стане обоени производи. Количината на производот е директно поврзана со количината на испитуваната супстанција во примерокот, така што може да се изврши квалитативна или квантитативна анализа според длабочината на бојата.

Високата каталитичка ефикасност на ензимите индиректно ги засилува резултатите од имунолошкиот одговор, правејќи ја анализата високо чувствителна. ELISA може да се користи за одредување на антигени, но може да се користи и за одредување на антитела.

Основни принципи на комплетот ELISA
Користи специфична реакција на антиген и антитела за да го поврзе објектот со ензимот, а потоа произведува реакција на боја помеѓу ензимот и супстратот за квантитативно определување. Предмет на мерење може да биде антитело или антиген.

Постојат три реагенси неопходни во овој метод на определување:
â Антиген или антитело од цврста фаза (имунолошки адсорбент)
â¡ Ензимски означен антиген или антитело (маркер)
â¢ супстрат за ензимско дејство (средство за развој на боја)

При мерењето, антигенот (антителото) прво се врзува за цврстиот носач, но сепак ја задржува својата имунолошка активност, а потоа се додава конјугат (маркер) на антитело (антиген) и ензим, кој сепак ја задржува својата првобитна имунолошка активност и ензим. активност. Кога конјугатот реагира со антигенот (антителото) на цврстиот носач, се додава соодветната супстрат на ензимот. Односно, каталитичка хидролиза или РЕДОКС реакција и боја.

Нијансата на бојата што ја произведува е пропорционална на количината на антиген (антитело) што треба да се измери. Овој обоен производ може да се набљудува со голо око, оптички микроскоп, електронски микроскоп, исто така може да се мери со спектрофотометар (инструмент за означување на ензимот). Методот е едноставен, удобен, брз и специфичен.

Претходна:Воведување на Elisa Plate

Следно:Зошто клеточната култура прво ги разложува црвените крвни зрнца?