Изборот на вистинската културна опрема е од клучно значење за да се обезбеди оптимален раст на клетките и експериментални резултати. При изборот на садови за клеточна култура, важно е да се земат предвид факторите како што се типот на клетката, специфичната цел на вашата култура, обемот на културата, типот на медиумот за култура, материјалите и големината на садовите, површинските третмани, капаците за правилна размена на гасови и нивната компатибилност со вашата лабораториска опрема.
Еве ги клучните фактори што треба да се земат предвид при изборот на вистинскиот сад за клеточна култура
1. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на типот на клетките
Прилепени клетки
На овие клетки им е потребна површина за прицврстување и ширење. За прилепени клетки, ќе ви требаат садови со површина што обезбедува доволно простор за прицврстување и раст на клетките.
Примери колби обработени со ткивна култура, петриеви садови и чинии со повеќе бунари.
Ќелии за суспензија
Овие клетки растат лебдејќи во медиумот, така што површината не се зема предвид.
2. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на големината (волумен капацитет)
Култури од мали размери
За експерименти од мали размери или скрининг со висока пропусност, помалите садови се идеални.
Примери Плочи со повеќе бунари (плочи за култура со 6, 24, 96 клетки),
Петри јадењаили T25 колби.
Култури од големи размери
Ако треба да одгледувате големи количини клетки, подобри се поголеми садови или биореактори.
Примери T75 и T175 колби за клеточна култура, биореактори или колби за вртење за суспензивни клеточни култури.
3. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на површинскиот третман
Површини обработени со ткивна култура
Садовите се претходно третирани за да се промовира приврзаноста на клетките, што ги прави погодни за прилепени типови клетки. Тие обично се обложени со супстанции како колаген, фибронектин или други компоненти на екстрацелуларната матрица.
Нетретирани површини
Идеален за суспензивни култури или кога клетките не треба да се прилепуваат на површината. Тие обично се користат за клетки кои растат слободно во медиумот.
4. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на материјалот
Полистирен најчесто се користи за стандардни апликации за клеточна култура. Јасно е, овозможувајќи лесна визуелна проверка и добро функционира и за прилепените и за суспензивните ќелии.
Поликарбонат или полипропилен се користат за одредени апликации на биореакторите и за садови кои бараат поголема флексибилност или специфични површински третмани.
Стаклото што се користи за стандардна култура на ткиво поради трошоците и кршењето, стаклените садови може да бидат погодни за специфични апликации или култури од големи размери.
Колби
За општа клеточна култура, најчесто се користат Т-колби (T25, T75, T150). Рамната површина обезбедува добра површина за прицврстување и раст на клетките. Тие можат да се користат и за адхерентни клетки и за суспензивни култури доколку се одржуваат соодветните услови.
Петри јадења
Вообичаено за мали култури и за експерименти кои бараат набљудување, како што се анализи за формирање колонии.
Плочи со повеќе бунари
Овие се корисни за скрининг со висок процент и експерименти од помал обем. Плочи со 6, 12, 24, 48,
96, или 384 бунари се достапни и се идеални за анализи базирани на клетки, ослободување цитокини, тестирање на лекови и други апликации со висока пропусност.
Спинер колби
Се користи за суспензија на клеточни култури, особено во поголеми количини каде што е неопходна контролирана агитација за да се одржи растот на клетките и да се избегне згрутчување на клетките.
Биореактори
За култура на суспензија од големи размери, биореакторите овозможуваат посложена контрола врз условите на животната средина (на пр., pH, температура, оксигенација) и се користат за производство со голем обем, како што е биофармацевтското производство.
6. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на стерилитет и вентилација
Стерилност
Проверете дали садот е стерилен или стерилизиран за да избегнете контаминација. Повеќето комерцијални садови за култура се претходно стерилизирани, но секогаш проверувајте го пакувањето.
Вентилација
Некои садови, како што се колбите, доаѓаат со вентилирани капачиња или филтри за да се овозможи размена на воздух додека се спречува контаминација. Ова е од суштинско значење кога се одгледуваат клетки во услови со висока густина.
7. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на практичноста за употреба
Автоклавирана наспроти еднократна употреба
Некои садови за култура може да се автоклавираат за повторна употреба (на пр., стаклени шишиња, одредени пластични колби), додека други се за еднократна употреба и за еднократна употреба (на пр., пластични садови за петри, чинии со повеќе бунари).
Ракување и транспорт
Размислете за леснотијата на пренесување на клетките помеѓу садовите. На пример, плочите со повеќе бунари може да бараат специјализирани плочи за лесно ракување со опрема како што се автоматски пипетори.
8. Изберете го садот за клеточна култура врз основа на волуменот на медиумот за култура
Изберете сад кој може да го смести саканиот волумен на медиум за култура без трошење ресурси. Ако работите со култура со голем волумен, може да бидат потребни поголеми колби или биореактори, додека помалите количини се погодни за садови или чинии за клеточна култура.
9. Изберете сад за клеточна култура врз основа на трошоците
За еднократна употреба наспроти еднократна употреба
Пластичните садови за еднократна употреба се исплатливи и го намалуваат ризикот од контаминација, но може да бидат скапи за операции од големи размери. Стаклените садови за повеќекратна употреба имаат повисока цена, но може да се стерилизираат и повторно да се користат повеќе пати, што ги прави поекономични за долготрајна употреба.
Ефикасност на волуменот
Уверете се дека големината на садот е соодветна за да се избегне трошење на материјали, особено кога користите скапи средства за раст или реагенси.
10. Изберете сад за клеточна култура врз основа на специфични барања за апликација
Слики
Ако треба да ги визуелизирате клетките под микроскоп, изберете садови со оптички проѕирни материјали и соодветни димензии за поставувањето на вашата слика (на пр., плочи со повеќе бунари за скрининг со висока содржина или садови со стаклено дно за сликање со живи ќелии).
Контролирана агитација
За суспензивни клеточни култури, земете ги предвид колбите со вртење или биореакторите кои обезбедуваат контролирана агитација за да ги одржуваат клетките рамномерно суспендирани.
Заклучок
Изборот на вистинскиот сад за клеточна култура бара балансирање на неколку фактори, вклучувајќи го типот на клетката, обемот на културата, компатибилноста на материјалот и специфичните експериментални потреби. Залепените клетки ќе бараат површини кои промовираат прицврстување, додека суспензивните ќелии имаат корист од поголемите волумени и мешањето. За работа од мал обем, може да бидат доволни плочи со повеќе бунари или Т-колби, додека за поголеми култури може да бидат потребни колби со вртење или биореактори. Секогаш погрижете се садовите да ги задоволуваат вашите барања за стерилитет и ракување и земете ја предвид економичноста врз основа на вашата употреба.
Со разгледување на овие фактори, можете да го изберете оптималниот сад што ги обезбедува вистинските услови за вашата клеточна култура и експерименталните цели.